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菌種的誘變育種之液晶顯示生化培養(yǎng)箱

更新時(shí)間:2019-04-25點(diǎn)擊次數(shù):1368

    喆圖小編以紫外線處理產(chǎn)蛋白酶的海洋細(xì)菌,通過(guò)透明圈法初篩,選擇蛋白酶活力高的菌株。

實(shí)驗(yàn)材料及設(shè)備

    產(chǎn)蛋白酶菌株、超凈工作臺(tái)、電磁力攪拌器、低速離心機(jī)、培養(yǎng)皿、涂布器、10mL 離心管、吸管、250mL三角瓶、恒溫?fù)u床、液晶顯示生化培養(yǎng)箱、直尺、棉簽、橡皮手套。

培養(yǎng)基和試劑
    1) 無(wú)菌生理鹽水、75%酒精

    2) 篩選培養(yǎng)基:脫脂奶粉培養(yǎng)基

    3) 海水2216E 液體培養(yǎng)基

實(shí)驗(yàn)步驟

    1. 出發(fā)菌株移接新鮮斜面培養(yǎng)基,于28℃液晶顯示生化培養(yǎng)箱恒溫培養(yǎng)24h;
    2. 將活化后的菌株接種于液體2216E 培養(yǎng)基,于28℃ 恒溫培養(yǎng)搖床150rpm 振蕩培養(yǎng)12h;
    3. 取1ml培養(yǎng)液于5ml離心管中,10000rpm 離心5min,棄去上清液,加1ml無(wú)菌生理鹽水,重新懸浮菌體,再離心,棄去上清,重復(fù)上述 步驟用1ml生理鹽水恢復(fù)成菌懸液;
    4. 將1ml上述菌懸液倒入無(wú)菌空平板中,再加入10ml無(wú)菌生理鹽水,磁力攪拌1min。 
    5. 將紫外燈打開(kāi),預(yù)熱30min;
    6.打開(kāi)無(wú)菌平板蓋,紫外照射處理60s,照射完畢后先蓋上平板蓋,再關(guān)閉攪拌和紫外燈;
    7.取處理過(guò)的菌懸液0.1ml涂布1個(gè)篩選平板;
    8.將誘變菌液在液晶顯示生化培養(yǎng)箱28℃黑暗中培養(yǎng)過(guò)夜,然后在紅燈下稀釋涂菌進(jìn)行初篩(避光培養(yǎng)),觀察在菌落周圍出現(xiàn)的透明圈大小。

      以上內(nèi)容僅供參考,如需了解詳情請(qǐng)聯(lián)系喆圖客服!

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