動物細(xì)胞培養(yǎng),都是需要用二氧化碳培養(yǎng)箱的.
細(xì)胞培養(yǎng)中所用的培養(yǎng)箱一般稱為CO2培養(yǎng)箱,它的氣體環(huán)境是95%的空氣和5%的CO2.
CO2既是細(xì)胞代謝產(chǎn)物,也是細(xì)胞所需成分,它主要與維持培養(yǎng)液的pH有直接關(guān)系.動物細(xì)胞多數(shù)需要微堿性環(huán)境,pH為7.7.4,以不超出6.7.6為宜.在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,隨著CO2釋放量的增多,培養(yǎng)基會變酸,因此常加入NaHCO3(與CO2溶于水后所形成的H2CO3構(gòu)成一個緩沖對)來調(diào)節(jié)pH.NaHCO3具有釋放CO2的傾向,加入CO2可以抑制這個反應(yīng)的進(jìn)行.
培養(yǎng)箱中CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中NaHCO3濃度相平衡,如果培養(yǎng)箱中CO2濃度設(shè)定在5%,培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量應(yīng)為1.97 g/L;如果CO2濃度維持在10%,則NaHCO3的加入量應(yīng)為3.95 g/L.
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